V minulých letech Coriell používal všechna tepelně inaktivovaná séra pro své buněčné kultury k inaktivaci proteinu komplementu, který se nachází v séru novorozenců telete. Protože jsme přešli na fetální bovinní sérum, zjistili jsme, že tepelná inaktivace není nutná pro většinu buněčných linií.
Jak dlouho tepelně deaktivujete FBS?
Pro tepelnou inaktivaci fetálního bovinního séra (FBS) je doporučen následující protokol. FBS se zahřívá na 56±2°C po dobu 30±2 minut v míchací vodní lázni. Tepelná inaktivace (HI) – proces, při kterém se FBS udržuje na teplotě 56±2° po dobu 30±2 minut.
Proč je pro FBS před použitím nutná tepelná inaktivace?
Obvyklým ošetřením FBS je tepelná inaktivace, kdy se FBS zahřívá na 56°C po dobu 30 minut ve vodní lázni za občasného protřepání. Účelem je inaktivovat jakékoli složky komplementového systému přítomné v FBS [24] a další potenciální neznámé inhibitory buněčného růstu.
Proč potřebujete sérum deaktivovat teplem?
Cílem tepelné inaktivace je zničit aktivitu komplementu v séru, aniž by to ovlivnilo vlastnosti produktu podporující růst. Odstranění aktivity komplementu ze séra není vyžadováno u většiny buněčných kultur, ale může být nezbytné u kultur, které jsou citlivé na aktivitu komplementu.
Jak skladujete tepelně deaktivované FBS?
Chraňte rozmražená FBS a další séra bezpečným chlazením aúložný prostor. Rozmražené sérum ihned použijte. Tekuté FBS a další sérum lze skladovat v chladu (2 až 8 °C) až čtyři týdny.