Inkubujte nádobu při pokojové teplotě 2–3 minuty . Pevně přilnavé buňky lze rychle oddělit při 37 °C. Pozorujte buňky pod mikroskopem. Oddělené buňky vypadají pod mikroskopem zaoblené a lámavé.
Co se stane, když trypsinizujete buňky příliš dlouho?
Inkubace buněk s příliš vysokou koncentrací trypsinu po příliš dlouhou dobu poškodí buněčné membrány a zabije buňky. Pokud si nejste jisti koncentrací trypsinu k použití, použijte nízkou koncentraci.
Jak provádíte trypsinizaci buněk?
Buňky lze resuspendovat jemným pipetováním buněčné suspenze, aby se rozbily shluky. V případě potřeby lze provést další ředění pro počty buněk a/nebo subkultivaci.
Jak dlouho trvá, než se buňky připojí?
první buňky se připojí již po 3-5 min! Podle mých zkušeností byla většina EC připojena po 10-20 minutách. Ale čím déle budete čekat, tím pevnější je připevnění.
Je špatné trypsinizovat buňky dva dny po sobě?
Ano, je škodlivé, pokud trypsinizujete své buňky nepřetržitě po 24 hodinách štěpení. Je vhodné provést štěpení po 48 hodinách štěpení. … Můžete udržovat buňky, dokud není morfologie dobrá (záleží na typu vaší buňky, některé buňky mohou mít až 80 pasáží a některé až 10).
