Protože je buněčná stěna tak odolná vůči většině sloučenin, kyselinovzdorné organismy vyžadují speciální techniku barvení. Primární barvivo používané v acidorezistentním barvení, karbolfuchsin, je rozpustné v lipidech a obsahuje fenol, který pomáhá barvivu proniknout buněčnou stěnou. K tomu dále napomáhá přidání tepla.
Proč je pro kyselinovzdorné barvení potřeba teplo?
Zahřívání sklíčka pomáhá změkčit voskový materiál na bakteriální buněčné stěně. Voskový materiál je hydrofobní vůči vodnému roztoku, ale ne vůči fenolickému roztoku bazického fuchsinu. Silný karbolfuchsin je tedy schopen obarvit buňku. Po obarvení mají tendenci odolávat odbarvení 20% H2SO4 (kyselina sírová).
Jak rychle kyselé skvrny?
Pokyny pro acidorezistentní barvení
- Sušte na vzduchu a teplem fixujte tenký film mikroorganismů. …
- Zaplavte skluzavku karbolfuchsinem. …
- Zaplavte sklíčko kyselým alkoholem po dobu 30 sekund. …
- Vytvořte kontrast zaplavením sklíčka methylenovou modří po dobu 30 sekund. …
- Sušte sklíčko tak, že ho vložíte mezi stránky knihy z Bibulous papíru.
Vyžaduje barvení podle Grama teplo?
Gramovo barvení se obvykle provádí na stěru, který byl tepelně fixován. Jednou funkcí fixace je zajistit (fixovat) buňky ke sklíčku. V biofilmu jsou však buňky již pevně spojeny. Dále tepelně fixovánosklíčko je suché, ale biofilm je převážně voda.
Jaká skvrna nevyžaduje teplo?
Zahrnuje aplikaci primárního mořidla (základní fuchsin), odbarvovače (kyselý alkohol) a kontrastního barviva (methylenová modř). Na rozdíl od barvení Ziehl–Neelsen (barvení Z-N), metoda Kinyoun barvení nevyžaduje zahřívání.
