Používejte fluorofory, které vyzařují ve vlnové délce dále od autofluorescenčních sloučenin ve vašem vzorku. Typicky jsou pro to nejlepší fluorofory s daleko červenou vlnovou délkou, jako je CoralLite 647. Bylo prokázáno, že komerčně dostupná činidla, jako je TrueVIEW (VectorLabs), snižují autofluorescenci z mnoha příčin.
Co způsobuje autofluorescenci?
Autofluorescence je emise fluorescenčního světla z očních struktur v nepřítomnosti fluoresceinu sodného. Stavy, které způsobují autofluorescenci, jsou drúzy hlavy zrakového nervu a astrocytární hamartom. Pseudofluorescence nastává, když se modrý budič a zelené bariérové filtry překrývají.
Jak snížíte fluorescenci pozadí?
Co můžete udělat pro snížení fluorescence pozadí
- Vyzkoušejte označení pomocí barviva, které odpovídá jinému filtru. …
- Změřte intenzitu fluorescence z jamky, která obsahuje pouze vaše buňky a lék nebo léčbu. …
- Zkontrolujte svá média. …
- Zkontrolujte své plavidlo.
Jak uhasíte autofluorescenci krve?
Jednou z nejpoužívanějších metod k utlumení autofluorescence je léčba tkáně barvivem Sudan Black B. Sudan Black B je barvivo rozpustné v tucích, které se váže na granule lipofuscinu a snižuje jejich fluorescenci.
Co je autofluorescence v mikroskopii?
Autofluorescence je přirozená emise světla biologickou cestoustruktur, jako jsou mitochondrie a lysozomy, když absorbují světlo, a používá se k rozlišení světla pocházejícího z uměle přidaných fluorescenčních markerů (fluoroforů).
