Densitometrická data generovaná pro Western bloty se běžně používají k porovnání množství proteinů mezi vzorky. … Nelineární denzitometrická data byla pozorována, když byly Western bloty detekovány pomocí infračervené fluorescence nebo chemiluminiscence a za různých podmínek SDS-PAGE.
Co je denzitometrická analýza?
Denzitometrie je kvantitativní měření optické hustoty v materiálech citlivých na světlo, jako je fotografický papír nebo fotografický film, v důsledku vystavení světlu.
Jak používáte denzitometrii na obrázku J?
Densitometrie pomocí ImageJ
- Klikněte na střed čtverce a přetáhněte jej do dalšího pruhu. …
- Pro poslední dráhu opakujte postup, ale stisknutím Ctrl a 3 nastavte poslední dráhu. …
- Pomocí nástroje čáry nakreslete čáry, abyste z výpočtů odstranili pozadí jízdního pruhu. …
- Přejděte na: Analyse→Gels→Label Peaks a získejte přehled.
Jak analyzujete výsledky Western blot?
Ověřte své kvantifikační nástroje . Spusťte například blot, kde jsou pruhy nabity 20 µg, 15 µg a 10 µg celkového proteinu. Po analýze by relativní kvantifikace cílových pásem měla být 2, 1,5 a 1. Vyzkoušejte různé kvantifikační nástroje a nastavení, dokud nebudete schopni spolehlivě reprodukovat správné výsledky.
Jak kvantifikujete western blot?
Krok 1: Určete odečtené pozadíhustoty vašeho zájmového proteinu (PI) a normalizační kontroly (NC). Krok 2: Identifikujte NC, která má nejvyšší hodnotu hustoty. Krok 3: Vydělte všechny hodnoty NC nejvyšší hodnotou hustoty NC, abyste získali relativní hodnotu NC.