Luciferin je běžný bioluminiscenční reportér používaný pro in zobrazení exprese luciferázy in vitro. Tento ve vodě rozpustný substrát pro enzym luciferázu Světlušky (typicky z Photinus pyralis) využívá ATP a Mg2+ jako kofaktory k vyzařování charakteristické žlutozelené emise v přítomnosti kyslíku.
Co dělá D-Luciferin?
Luciferin je běžný bioluminiscenční reportér používaný pro in vivo zobrazování exprese luciferázy . Tento ve vodě rozpustný substrát pro enzym luciferázu světlušek využívá ATP a Mg2+ jako kofaktory k vyzařování charakteristické žlutozelené emise v přítomnosti kyslíku., které se in vivo posouvá do červeného světla při 37 °C.
Co je D-Luciferin draselný?
Podrobnosti. Draselná sůl D-luciferinu je užitečným substrátem pro enzym luciferázu světlušek. Po oxidaci enzymem luciferázou vytváří bioluminiscenci. D-Luciferin lze použít k testování exprese genu luciferázy spojeného s promotorem zájmu.
Jak vyrábíte D-Luciferin?
1. Připravte 200X zásobní roztok luciferinu (30 mg/ml) ve sterilní vodě. Jemně promíchejte převracením, dokud se luciferin zcela nerozpustí. Použijte okamžitě nebo alikvotně a zmrazte na -20 °C pro budoucí použití.
Jak aplikujete injekci luciferinu?
(Luciferin se obvykle podává buď intraperitoneálně nebo intravenózně.) Příklad: Injikujte 10 µlZásobní roztok luciferinu na gram tělesné hmotnosti (normálně ~200 ul pro 20g myš pro standardní injekci 150 mg/kg). 5. Před snímkováním počkejte 10–20 minut, aby se dosáhlo maximálního plató signálu luciferázy.