Izolace mezenchymálních kmenových buněk z pupeční šňůry
- Umyjte pupeční šňůry (UC) v roztoku chlornanu (1:3).
- Opláchněte UC pomocí PBS.
- Uchovávejte UC v 10% FBS/DMEM s nízkou glukózou po dobu až 12 hodin.
- Umyjte UC třikrát pomocí PBS.
- Vstříkněte do žíly a tepen 3 ml 0,1% kolagenázy v PBS.
- Inkubujte 20 minut při 37°C.
Jak získáte mezenchymální kmenové buňky?
Mezenchymální kmenové buňky jsou dospělé kmenové buňky izolované z různých zdrojů, které se mohou diferencovat na jiné typy buněk. U lidí tyto zdroje zahrnují; kostní dřeň, tuk (tuková tkáň), tkáň pupeční šňůry (Wharton's Jelly) nebo plodová voda (tekutina obklopující plod).
Jak izolujete mezenchymální kmenové buňky?
MSC se obvykle izolují jako populace buněk adherujících k plastu pomocí jednoduchých postupů zahrnujících mletí tkání, volitelné enzymatické štěpení a růst buněk na plastovém povrchu. Postupy lze obecně rozdělit na enzymatické a explantační protokoly.
Umíte extrahovat své vlastní kmenové buňky?
Autologní znamená, že vaše vlastní kmenové buňky budou sklizeny, uloženy a vráceny vám později. Periferní krev je krev, která cirkuluje ve vašich krevních cévách. Poté, co jsou vaše kmenové buňky sklizeny, dostanete velmi vysokou dávku chemoterapie, která zabije zbývající rakovinné buňky ve vašem těle.
Jak získáváte kmenové buňky?
Nejběžnější způsob sběru kmenových buněk zahrnuje dočasné odstranění krve z těla, oddělení kmenových buněk a následné navrácení krve do těla. Ke zvýšení počtu kmenových buněk v krvi budou asi 4 dny předem podávány léky, které stimulují jejich tvorbu.
