Produkt restriktivního štěpení lze snadno skladovat při -20 °C. Při 4 °C by to bylo v pořádku, ale abychom zajistili, že nedojde k žádné aktivitě a žádné hvězdné aktivitě. doporučujeme uchovávat při -20 C.
Jak uchováváte natrávenou DNA?
Zkuste uchovat gelový plátek přes noc do lednice nebo ho dokonce rozpustit v pufru a zmrazit na -20 °C nebo -80 °C. Degradace DNA bude probíhat stejnou rychlostí a za stejných podmínek jako rozpustná DNA, proto používejte nižší teplotu pro delší skladování.
Co znamená štěpení plazmidu?
Přečištěná plazmidová DNA je štěpena 1 nebo více restrikčními enzymy (RE) vybranými tak, aby poskytly zřetelný vzor pásů DNA, který lze snadno rozlišit elektroforézou. … Obvykle jsou vybrány restrikční enzymy, které štěpí v rámci vícenásobného klonovacího místa (MCS) a vedou k diagnostickému vzoru 2-5 snadno rozlišitelných pásů.
Jak uchováváte linearizované plazmidy?
Pokud se obáváte následných účinků TE, skladujte DNA při vyšší koncentraci a v případě potřeby ji zřeďte nebo použijte „nízký TE“, což je 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. když je DNA nebo RNA čistá, může být skladována při -20 °C po mnoho měsíců bez jakékoli degradace.
Jak dlouho dokážete udržet restriktivní přehled?
Pro-Tip V závislosti na aplikaci a množství DNA v reakci se může inkubační doba pohybovat od 45 minut do noci. Pro diagnostické výtahy často postačuje 1–2 hodiny. Pro štěpení s >1 µg DNA použité pro klonování se doporučuje štěpení po dobu alespoň 4 hodin.
